Décoronisation pré-ICSI des ovocytes fiv avec microinjection
Il existe deux procédures de décoronisation :
I - l'une se fait dans une boîte à 4 puits, sans huile :
cette boîte est préparée 12 heures avant son utilisation, elle contient :
Dans le puits 1 : 300 ul de milieu de culture IVF vitrolife, dans lequel on ajoutera extemporanément 300 ul. d'une solution
préchauffée de hyluronidase fertipro à 80 UI/ml ( ou 30 ul de "HYASE 10X), pour ramener l'ensemble à 40 UI/ml.
dans le puits 2,3,4 : 600 ul. d'IVF vitrolife.
Le début de la décoronisation sera pratiquée dans le puits en utilisant des « cônes jaunes stériles » pour pipette automatique.
On procèdera par aspiration et refoulement succéssifs des ovocytes et de leur cumulus jusqu'à décolement des cellules de la corona.
puis on utilisera ensuite, pour parfaire le nettoyage et rinçer les ovocytes décoronisés dans les puits 2,3,4 :
- Soit des pipettes pasteurs éffilées et pré - calibrées à 125 - 130 um.
- Soit Le EZ-STRIP : embouts en matière souple et calibrés à 150, 135 ou 125 micrométres conçus pour ce travail particulier.
Leur souplesse évite les blessures sur la partie externe de l'ovocyte.
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II - L'autre se fait dans une boite de Pétri pour culture cellulaire, sous huile

Cette boite est préparée 1 à 2 à heures avant son utilisation, elle contient :
1 goutte de 300 ul de hyluronidase titrée à 40 UI/ml (voir au dessus).
5 à 6 gouttes de 20 à 30 ul. d'IVF Vitrolife pour les différents lavage avant incubation, en attente de la microinjection.
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