LA VITRIFICATION

Devant les bons résultats obtenus, la vitrification est considérée aujourd'hui comme une alternative interessante à la congélation lente des embryons, du stade J2 au stade blastocyste.
Elle présente plusieurs avantages :
- L'avantage principal est la cryopréservation très rapide des spécimens, ce qui représente un gain de temps formidable quand on a peu d'embryons à congeler. Cependant, la vitrification de nombreux embryons demande une organisation sans faille et une présence constante pendant tout le temps de la procédure.
- L'autre avantage est ciblé sur les nouvelles structures qui s'installent et qui peuvent faire l'impasse, provisoire ou définitive, sur l'achat d'un programmateur de congélation.

En contrepartie, cette technique demande un apprentissage préalable afin de bien maitriser tous les gestes opératoires dans les temps qui sont imposés par la technique.
Les différences fondamentales qui existent entre les 2 techniques (congélation lente et vitrification) se situent essentiellement au niveau de la préparation des embryons.
La maîtrise des temps de contact et des concentrations en cryoprotecteurs permettront une forte déshydratation sans effet toxique constatée.




En EUROPE :
Depuis les débats au Parlement européen et les prises de position sur les principes de congélation des cellules humaines, il est recommandé d’utiliser des méthodes « aseptiques », s’opposant à la vitrification utilisant des systèmes « ouverts » plongés directement dans l'azote liquide; ce qui peut être potentiellement source de contaminations virales ou bactériennes.

Les systèmes fermés auront une cinétique plus lente de descente en température. mais l'utilisation de kits de préparation des embryons adaptés permettront d'obtenir les résultats escomptés.
Dans tous les cas l'agitation constante pendant la vitrification évitera le phénomène de barrière d'évaporation autour de la paillette. Ce qui diminuerait le contact avec l'azote liquide et aurait une incidence sur la vitesse de descente en température.LES SYSTEMES ASEPTIQUES DE VITRIFICATION ET DE CONSERVATION DES EMBRYONS

VITRIFICATION avec Vitrisafe* Haute sécurité



Les plugs Vitrisafe* une fois utilisé sont introduits dans une paillette (CBS straw de 0,5 ml) et fermés au deux extrémités par soudure.
L'ensemble est ensuite plongé dans l'azote liquide et agité pendant le temps de l'ébulition de l'azote pour éviter la barrière d'évaporation. Puis, après quelques minutes, transféré en container de stockage.

Quelques éférences bibliographiques

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